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解决胎牛血清使用中的常见问题
点击次数:450 发布时间:2018-02-02
   1、 如何储存和解冻胎牛血清才不会使产品质量受损?
  将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
  长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。
  我们建议胎牛血清应保存在-2O ℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
  2、胎牛血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?
  沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g ,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。
  3、实验室如何选择适合的胎牛血清?
  国内一致认为血清是zui好的,但是根据我在北美的经历,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了 。此外,由于国内HYCLONE ,GIBCO 并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。所以,我一般会从直销员那里买血清,有的国外生物公司由于刚刚进入中国,知名度不高,但是其实在 国外已经做得很不错了,如Wisent 等,他们在国内有办事处,我会从那里拿,血清的品质和HYCLONE 不相上下,但价格相对优惠很多。
  4、 如何避免胎牛血清中产生沉淀?
  按如下操作可避免沉淀的产生:
  (1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
  (2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。
  (3) 勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
  (4) 勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
  (5) 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
  (6) 若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。

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